Технические данные
Колонка/опреснительная пластина sephadex g-25 инструкция по применению
Введение в продукт
Опреснительная колонна/пластина Dextran G-25 в основном использует функцию молекулярного сита в своих гелевых полимерных соединениях декстрана с сетчатой структурой. Из-за различных размеров молекулярного веса разделенных веществ, когда разделенные вещества проходят через гель G-25, вещества с большим молекулярным весом (например, белки) блокируются снаружи частиц геля и вытекают через зазор между частицами геля, процесс короткий, а скорость движения высокая, поэтому вещества с большим молекулярным весом будут вытекать из колонны/пластины первыми. Вещества с малым молекулярным весом (например, соли) могут проникать в микропоры частиц геля, процесс длительный и медленный, а вещества с большим молекулярным весом дольше вытекают из колонны/пластины геля, поэтому они в конечном итоге вымываются, и, таким образом, вещества разделяются.
Параметры сред серии Sephadex G-25 приведены в таблице.
| Projectт | параметрический |
| Функции | Грязно-белый гель |
| Средний размер частиц (сухой) | 150±100мкм 92,8 |
| Распределение размера частиц (45-165 мкм)% | ≥80 |
| Сплит-диапазон (португальский) | 100-5000 |
| Диапазон разделения (глобулин) | 1000-5000 |
| Соотношение воды (мл влажного клея/г сухого порошка) | 2.3-2.7 |
| Линейный расход (0,3 МПа, см3/ч) | 697.1 |
| Максимальная скорость потока (см3/ч) | 150 |
| Раствор для консервации | 0,2 М NaAc 20 процентов этанола |
| условия хранения | 4'C-30'C |
Номер модели G указывает на количество воды, поглощаемой одним граммом геля, например, гелевая среда G-25 указывает на то, что на один грамм сухого геля поглощается 2,5 мл воды, т.е. на коэффициент расширения геля, который также является размером пор частиц геля.
Хроматографические среды серии Sephadex G-25 широко используются для буферного обмена, опреснения белков, разделения белков с различной молекулярной массой и т. д. Максимальный объем образца для опреснения и буферизации может составлять до 30% от объема слоя колонки.
Рабочий процесс
1. Балансировка динамика/планшета: как только динамик/планшет с предварительно загруженным G-25 Sefadex окажется в вертикальном положении, сбалансируйте обессоливающую колонку/планшет G-25 буфером в 5–10 раз больше объема слоя колонки. (Примечание: буфер — это желаемый буфер для замены, например PBS, деионизированная вода и т. д.; будьте осторожны, контролируйте скорость потока)
2. Отбор проб: После того, как колонка/пластина геля сбалансированы с буфером, пипеткой отберите образец и медленно добавьте его в сито на поверхности геля, откройте нижнюю крышку и дайте образцу медленно войти в гель, пока он не окажется на одном уровне с гелем. (Примечание: объем образца на дне обычно составляет 10–30 % от объема слоя колонки, вязкость образца не должна быть слишком высокой, в противном случае срок службы сальника G25 сократится).
3. Элюирование: образец элюируется элюирующим буфером после того, как он полностью попадет в гель. (Примечание: рекомендуемая скорость потока образца составляет около 1–2 мл/мин. Объем элюирования обычно в 1,2–2,0 раза превышает объем образца).
4. Очистка и регенерация: некоторые белки денатурируются в солевом растворе, поэтому может потребоваться очистка этих белков путем промывания слоя колонки 0,2 М NaOH или другим неионным детергентом.
5. Хранение: После эксперимента хранить в 0,02% растворе азида натрия или 20% растворе этанола.